細胞計數(shù)板的計數(shù)誤差范圍通常在 ±10% 至 ±15% 左右。
影響細胞計數(shù)板計數(shù)誤差的因素有很多,主要包括以下幾個方面:
一、操作因素
加樣不準確:加樣量過多或過少都會影響計數(shù)的準確性。如果加樣過多,細胞可能會重疊,難以準確計數(shù);加樣過少則可能導(dǎo)致計數(shù)結(jié)果偏低。
細胞分布不均勻:如果細胞懸液在計數(shù)板上分布不均勻,會使計數(shù)結(jié)果產(chǎn)生偏差。例如,在加樣過程中產(chǎn)生氣泡或細胞沉淀,都會導(dǎo)致局部細胞密度的變化。
計數(shù)方法不規(guī)范:對于壓線細胞的計數(shù)規(guī)則不一致、漏計或重復(fù)計數(shù)等都會增加誤差。
二、細胞特性因素
細胞大小和形態(tài)差異:不同類型的細胞大小和形態(tài)各異,這可能會影響在計數(shù)板上的觀察和計數(shù)。例如,一些較小的細胞可能難以與雜質(zhì)區(qū)分,而一些不規(guī)則形狀的細胞可能在計數(shù)時容易產(chǎn)生歧義。
細胞活性:死細胞和活細胞在形態(tài)和染色特性上可能存在差異,這可能會干擾計數(shù)結(jié)果。此外,細胞的聚集或黏附也可能影響計數(shù)的準確性。
三、環(huán)境因素
溫度和濕度:溫度和濕度的變化可能會影響細胞懸液的穩(wěn)定性和細胞的形態(tài),從而影響計數(shù)結(jié)果。例如,在較高溫度下,細胞可能會變形或破裂,而在較低濕度下,細胞懸液可能會蒸發(fā),導(dǎo)致細胞密度的變化。
光照條件:在計數(shù)過程中,光照強度和角度的變化可能會影響細胞的觀察和計數(shù)。過強或過弱的光照都可能使細胞難以分辨,從而增加計數(shù)誤差。